Technika mikroskopowa
Typy mikroskopów
n Mikroskopy optyczne:
n Mikroskop świetlny:
n Zwykły
n Ultrafioletowy
n Fal podczerwonych
n Ultramikroskop
n Mikroskop polaryzacyjny
n Mikroskop optyczny fluorescencyjny
n Mikroskop optyczny kontrastowo - fazowy
n Skanujące mikroskopy optyczne: odbiciowe, fluorescencyjne, dopplerowskie.
n Mikroskopy nieoptyczne:
n Mikroskop elektronowy
n Skanujący (SEM)
n Mikroskop sił atomowych.
Układ parafokalny - różne obiektywy mają prawie identyczną odległość przedmiotową.
Granica maksymalnego powiększenia w mikroskopie optycznym zależy od soczewek.
Mikroskopy działające na zwykłe światło osiągają maksymalne powiększenia rzędu 1 500x.
Najlepsze mikroskopy optyczne, działające na spolaryzowane światło ultrafioletowe, dają powiększenie do ok. 3 500x.
Mikroskop optyczny
Obserwacja drobnoustrojów
§ Umożliwia obserwację drobnoustrojów głównie w postaci zabitej i barwionej.
§ Barwienia proste pozwalają na ocenę kształtu, wielkości i ułożenia drobnoustrojów.
§ Korzystając ze specjalnych technik barwienia można zaobserwować dodatkowe struktury: rzęski, otoczki, przetrwalniki, ziarna wolutynowe.
Ultramikroskop
Mikroskop optyczny posiadający boczny układ oświetlenia.
Służy do wykrywania obiektów o rozmiarach mniejszych od zdolności rozdzielczej mikroskopu świetlnego.
Padająca fala świetlna ulega na preparacie silnym ugięciom, dochodzącym do 90 stopni.
W ultramikroskopie można stwierdzić, że w danym preparacie występują badane elementy, ale nie można dokładnie ustalić ich kształtu i wielkości.
Mikroskop fluorescencyjny
Mikroskop świetlny wykorzystujący zjawisko fluoroscencji i fluororescencji.
Fluoroscencja próby może być pochodzenia:
- naturalnego,
- sztucznego, które jest wynikiem dołączenia fluoroforów (FITC, TRIC czy PE)
Do zadziałaniu fali świetlnej o odpowiedniej długości dochodzi do wzbudzenia fluoroforu, co obserwuje się jako świecenie charakterystycznym dla danej długości fali kolorem.
Mikroskop fazowo - kontrastowy
§ Pozwala na oglądanie drobnoustrojów umieszczonych w kropli wody oraz na odróżnienie struktur komórkowych bez barwienia.
§ Umożliwia wykazanie bakterii w nie barwionych fragmentach tkanek oraz analizę szczegółowych struktur wewnątrzkomórkowych.
§ Specjalna optyka w tym mikroskopie uwzględnia różnice w gęstości materiałów biologicznych i ich współczynników załamania światła.
Mikroskop elektronowy
n Mikroskop wykorzystuje do obrazowania wiązkę elektronów.
n Umożliwiają obserwację obiektów na poziomie atomów.
n Badana próbka znajduje się w próżni i najczęściej jest pokrywana warstewką metalu. Wiązka elektronów, generowana przez działo elektronowe, jest ogniskowana za pomocą soczewek magnetycznych i przemiata badany obiekt, po czym trafia do detektora. Urządzenia elektroniczne odtwarzają na podstawie zmierzonych sygnałów obraz badanej próbki.
n Mikroskop elektronowy pozwala uzyskać powiększenia 250 000x. Powiększenie sięgające 5 000 000x można uzyskać w podobnych konstrukcjach, przy zastąpieniu elektronów wiązką jonów (mikroskop jonowy), w szczególności jonów wodoru, czyli protonów (mikroskop protonowy).
2
Blackkalia