OZNACZANIE ILOŚCI BIAŁEK W PRÓBKACH ŚRODOWISKOWYCH.doc

(50 KB) Pobierz
OZNACZANIE ILOŚCI BIAŁEK W PRÓBKACH ŚRODOWISKOWYCH

Dorota Olszewska  , Weronika Kwiecień  IS2

 

 

OZNACZANIE ILOŚCI BIAŁEK W PRÓBKACH ŚRODOWISKOWYCH

Metoda: Oznaczanie białek metodą Lowry’ego

 

Wykonanie:  Do 3 probówek pipetujemy 0.4 ml rozcieńczonego mleka Gostyń 3.2%UHT do 1:1000. Do 1 probówki dodajemy świeżo przygotowany roztwór 0,5 ml 2% K2C4H6O4 i 1% CuSO4*5 H2O rozpuszczonych w 2% alkalicznym roztworze Na2CO3 , a następnie mieszamy. Jednocześnie wykonujemy próbę kontrolna, gdzie zamiast roztworu mleka jest woda destylowana. Próbkę 1i 2i3 odstawiamy na 10 min. a następnie dodajemy 0,2 ml odczynnika E (odczynnik Folina), mieszamy 2 sekundy. Po 30 min. inkubacji w ciemnym miejscu mierzymy absorbancję przy długości fali l=750 nm.

 

Wyniki:


rozcieńcznie

próbka

ekstynkcja

stężenie
rozcieńczonego
białka [mg/ml]

stężenie białka [mg/ml]

stężenie białka [g/l]

stężenie białka %
[g/100 ml]

100

1

0,996

326,72246

32672,25

32,67225

3,267

2

1,124

369,48214

36948,21

36,94821

3,695

3

1,092

358,79222

35879,22

35,87922

3,588

200

1

0,470

151,00690

30201,38

30,20138

3,020

2

0,458

146,99818

29399,64

29,39964

2,940

3

0,527

170,04832

34009,66

34,00966

3,401

 

1

0,326

102,90226

20580,45

20,58045

2,058

250

2

0,363

115,26248

23052,50

23,05250

2,305

 

3

0,346

109,58346

21916,69

21,91669

2,192

500

1

0,147

43,10552

4310,55

4,31055

0,431

2

0,158

46,78018

4678,02

4,67802

0,468

3

0,163

48,45048

4845,05

4,84505

0,485

1000

1

0,011

-2,32664

-465,33

-0,46533

-0,047

2

0,036

6,02486

1204,97

1,20497

0,120

3

0,138

40,09898

8019,80

8,01980

0,802

2000

1

0,032

4,68862

468,86

0,46886

0,047

2

0,032

4,68862

468,86

0,46886

0,047

3

0,036

6,02486

...
Zgłoś jeśli naruszono regulamin