13. Budowa bakterii – *Brak zorganizowanego jadra, bl.jadrowej, jaderek. *DNA nagi, jeden chromosom zwany genoforem, przyczepiony do bl kom lub do mezosomu, zawieraja także pozachromosomowe czynniki dziedziczenia (plazmidy, transpozony, bakteriofagi) *Brak mitochondriow i plastydow *Brak SS, ap Golgiego, lizosomow, wakuol *Sciana kom z mukopolisacharydow (peptydoglikan, mureina), u G+ z peptydoglikanu, kwasy tejchojowe, kwasy mykolowe ; u G- z peptydoglikanu, oraz wystepujacych w bl zew: fosfolipidow, bialek i lipopolisacharydu( tylko u bakt G-) *rybosomy 70S, brak histonow *3-warstwowe bl cytoplazmatyczne, nie zawieraja steroidow (wyjatek Mycoplasmy) *Pozakomorkowe dodatki (rzeski)-sa prostymi helikalnymi bialkami (jedno, dwu i kolorzese) *Na zew stronie blony wewnetrznej sa PBP- bialka wiazace penicyliny.
14. Budowa bakterii G+ G- z uwzglednieniem sciany komorkowej. G+: struktura jednolita *aminocukry 10-30% *aminokwasy 3-4% *lipidy0-2% *peptydoglikan gruba warstwa 80-100%grubosci * kwasy tejchojowe- polimery bogate w fosfor, rybitolowe i glicerolowy- wielocukry czynne immunologicznie G-: budowa warstwowa *aminocukry1-10% *lipidy10-20% *aminokwasy14-18% *peptydoglikan cienka warstwa 10-20% grubosci *lipoproteiny *antygen O (LPS) Peptydoglikan- duza czasteczka teorzaca szkielet kom, lancuchy wielocukrowe (2 aminocukry polaczone wiaz B1-4: N-acetyloglukozamina, kw N-acetylomuraminowy). Funkcje mureiny: *ochrona przed zmianami osmotycznymi *przed rozpuszczalnikami, detergentami *nadaje ksztalt kom *utrzymuje turgor *elastycznosc i wytrzymalosc *funkcja sita molekularnego *podzial kom i wzrost *kotwiczy i stabilizuje struktury zew kom.
16. Budowa i znaczenie LPS – sa to dlugie heteropolimery zlozone z 3ech regionow polaczonych ze soba :lipid A, oligocukier rdzeniowy i wielocukier o swoistosci antygenowej O bedacy antygenem somatycznym. Oligosacharyd rdzeniowy jest podobny u wszystkich bakt, nazywany Antyg.wspolnym lub Kunina. Antyg somatyczny- zbudowany z cukrow prostych, jest on podstawa do podzialu bakt G- do rodzajow, gatunkow i serotypow. Lipid A- zbudowany z dwucukru glukozaminylowego polaczonego z kw tluszczowymi.Hamuje on dyfuzje przez glone roznych zwiazkow hydrofobowych (kw zolciowe, detergenty, antyb). LPS wykazuje toksycznosc wobec ssakow. Odpowiedzialny az objawy chorobowe: *wstrzas endotoksyczny *reakcje skórne *gorączka *leukocytoza *aktywacja dopełniacza, czynnika Hagemana , makrofagów, syntezy interferonu *działanie mitogenne *spadek RR *aktywność adiuwantowa.
28.Chemioterapia empiryczna i racjonalna - Racjonalna –Zasady: *Znajomosc zw.chemicznego *Spektrum dzialania (ocena aktywnosci MIC, MBC, MIC50, waskie lub szerokie spektrum, dzialanie selektywne) *Mechanizmy dzialania ch.t. *Mechanizmy nabywania opornosci *Efekt poantybiotykowy *Antybiogram lub antymykogram jako podstawa do wyboru ch.t. *Toksycznosc, wspolczynnik terapeutyczny *Objawy uboczne *Sposób leczenia (normalny, przewlekly). Empiryczna-wybor antyb.do terapii zakazenia bez oczekiwania na wynik badania bakteriologicznego. Oparta na znajomosci zwiazku i spektrum jego dzialania, farmakokinetyki, efektow niepozadanych, oraz na informacjach pochodzacych z badan epidemiologicznych, które dostarczaja informacji o czynnikach etiologicznych i ich wrazliwosci na antyb. Powinno zastosowac się odpowiedni dobor- ograniczenie liczby antyb. i uszeregowanie ich w odpowiedniej kolejnosci.
35.Chromosomalne i pozachromosomalne czynniki dziedziczenia –(chyba u bakterii?) Chromosomalny czynnik dziedziczenia to nukleoid, material genetyczny w postaci DNA nie zawiera prawdziwych chromosomow , nie jest otoczony blona, wystepuje pojedynczo w komorce (haploid). Ma postac podwojnej spirali z 2och komplementarnych lancuchow polinukleotydowych zwinietych w klebek, przytwierdzony jest do mezosomu lub do sciany komorkowej. Zawiera geny regulatorowe , strukturalne. Pazachromosomalne: *Plazmidy –Dwuniciowa kolista struktura DNA zdolna do autonomicznej replikacji ( posiada odcinki z genami zdolnymi do replikacji). Determinuja cechy które zwiekszaja mozliwosc przezycia komorki w okreslonych warunkach srodowiska. *Transpozony –krotkie czasteczki translokacyjne, mogą niesc geny zjadliwosci, opornosci. *Bakteriofagi –wirusy bakteryjne w komorkach lizogennych, przenosza geny odpowiedzialne za powstawanie toksyn np. u gronkowcow i opornosci na antybiotyki.
39.Cytokiny – ich zadaniem jest przekazywanie sygnalow miedzy komorkami. Dzieki interakcji ze swoistymi receptorami, innymi cytokinami, macierza tkankowa tworza siec regulacyjna. Pelnia wazna role w odpowiedzi organizmu na zakazenia , procesach naprawczych tkanek oraz gojenia się ran. Sa to rozpuszczalne glikoproteiny o niskiej masie czasteczkowej. Mogą dzialac na drodze endo, para i autokrynnej.Cytokiny wytwarzane sa przez limf.T i B, makrofagi, fibroblasty, astrocyty, neutrofile, kom. dendrytyczne kom.srodblonka, szpiku kostnego Do cytokin zaliczamy: *Interleukiny (okolo20). Np.Interleukina 2- wytwarzana przez limfocyty T i B. Reguluje aktywnosc limf. T,B i monocytow, jest istotna w powstawaniu limf.Tc, indukuje wydzielanie interferonug .*Interferony a (bialokrwinkowy), b (fibroblastyczny), g (immunologiczny)- maja znaczenie w odpowiedzi p-wirusowej, aktywacji limf. NK, indukuja ekspresje MHC II wytwarzane w nastepstwie zakazenia. *Czynniki wzrostu PDGF (plytkowy czynnik wzrostu), FG (fibroblastyczny), EGF (epidermalny), insulinopodobny. *Czynniki stymulujace powstawanie kolonii (CSF).
74.Immunoglobuliny
Należą do glikoprotein, cząsteczka ich zawiera 82-96% białka i 4-18% węglowodanó. Każda zbudowana jest z 2 jednakowych łańcuchów ciężkich i 2 jednakowych łańcuchów lekkich, związanych ze sobą mostkami disiarczkowymi. Fragmenty N-końcowe charakteryzują sięzmiennym skłądem aminokwasowym. Funkcja częsi zmiennej polega na łączeniu się z antygenem. Częsci stałe wiążą sie ze sobą utrzymując cząsteczkę w całości, odpowiedzialne są również za funkcje efektorowe- wiazanie dopełniacza, przechodzeniu cząsteczki przez łożysko, przylączenie cząsteczki do blony komórkowej.Większość Ig ludzkich ma giętki odcinek leżący pomiędzy częściami Fab i częściami C końcowymi łańcuchów cieżkich, zwany regionem zawiasowym.. Na podstawie strukturalnych i biologicznych i antygenowych rożnic dotyczących łańcuchów ciężkich wyrożniono 5 klas Ig. IgG stanowi największą frakcję Ig w surowicy , u zdrowych wynosi ok.75 %. Na podstawie różnic antygenowych klasa ta jest podzielona na 4 podklasy. Poszczególne różnia się właściwościami fizycznymi i chemicznymi oraz biologicznymi. Stężenie podklas zależy od wieku. U plodu pod koniec ciąży i u noworodków IgG wszystkich podklas pochodzą od matki, steżenie to obniża sie potem po urodzeniu i osiąga min w 3-6 mioesiacu życia.Nieprawidłowe stężenia podklas IgG w surowicy krwi u pacjentów z monoklonalnymi gammapatiami i z nawracającymi zakażeniami. Niedobór podklas IgG doprowadza do wzrostu wrazliwości na zakażenia wirusowe lub bakteryjne. Udział poszczególnych podklas w odpowiedzi immunologicznej jest rozna. W przebiegu wiekszości zakażeń najpierw wytwarzane są p/ciała IgM a potem IgG. IgA występuje w surowicy w postaci monomeru, jest wytwarzana w węzłąch chlonnych i śledzionie. P/ciala tej klasy nie wiażą dopełniacza, natomiast reagują z antygenami obecnymi we krwi. Zasadniczą rolą Iga jest obrona nabłonków błon śluzowych, w zwiazku z tym występują w najwyższych steżeniach w wydzielinach- łzy, slina, wydzielina oskrzelowa.Najwieksze ilości wydzielniczej IgA wytwarzane są przez kom.plazmatyczne w blaszcze podstawnej jelita, plazmpcyty blony sluzowej oskrzeli, mastocyty związane z gruczołąmi. Cząsteczka Sc-IgA składa się z 2 cąsteczek IgA zwiazanych łańcuchem J i z fragmenu wydzialniczego. Łańcuch J jest glikopeptydem i chroni cząsteczke przed działaniem enzymow trawiennych, fragment wydzielniczy ulatwia transport IgA przez nabłonek i wydzielania do leż, śliny, mleka. Sc-IgA nie wiąże dopełniacza, nie uczestniczy w opsonizacji.Głowne zadanie- neutralizacja drobnoustrojów poprzez wiazanie sie z nimi fragmentem Fab, w wyniku czego powstają kompleksy immunologiczne, a drobnoustroje nie przylegają do komórek nabłonka.IgM- duży pentamer zbudowany z 5 monomerów IgM polączonych lańcuchem J. Nie przechodzi przez łożysko.P/ciała tej klasy pojawiają się jako pierwsze w przebiegu odpowiedzi immunologicznej, mają krotki okres zycia, ich obecność jest wskaźnikiem zakażenia, które rozwinęło się niedawno.IgE u zdrowych ludzi występują w ilosciach śladowych, wyższe stezenia są u pacjentów z atopią. P/ciała te są cytofilne, wiążą sie z receptorami IgE na powierzchni mastocytów i bazofilów i in. IgD nie ma zdolności wiazania dopełniacza, funkcja jej noie jest jasna.
87.Mechanizmy nabierania odpornoscina chemioterapeutyki przez
Do mechanizmów oporności należą: 1. Zmiany mutacyjne genow własnych, które wczesniej nie były odpowiedzialne za oporność tych genów, lub też genów, które wcześniej odpowiadaly za oporność na inne antybiotyki. 2. Zmiany ekspresji informacji genetycznej na poziomie transkrypcji lub translacji. 3. Ulatwienie horyzontalnego przekazywania genów pomiędzy odległymi filogenetycznie grupami bakterii. 4. Synteza nowych ukladów białkowych. Odporność nabyta przez bakterie moze być wynikiem mutacji, np. oporność krzyzowa na chinolony w wyniku mutacji genu gyrA lub na cefalosporyny z wyjątkiem cefamycyn, w następstwie punktowej mutacji genu blaTEM lub blaSHV. Oporność moze narastać etepowo, co zdarza sie u wieloopornych szczepóów Mycobacterium tuberculosis. Mutacje są przyczyną nabierania oporności u gatunków bakterii, które w warunkach naturalnych nie wymieniają miedzy soba DNA. Mutacje mogą być przyczyną wzrostu bakterii zaleznego od obecności antybiotyku w podłożu- ‘tolerancja’, np. enterokoki zależne od wankomycyny. Bakteriwe mogą nabywać obcy DNA na drodze transformacji, transdukcji i koniugacji. Na drodze koniugacji mogą być przenoszone plazmidy itranspozony. Wazne jest że przez transpozony koniugacyjne u ziarniaków Gram-dodatnich mogą być przenoszone geny oporności pomiędzy filogenetycznie odległymi rodzjami bakterii. Rozprzestrzenianie się opornisci na antybiotyki w warunkach naturalnych jest często wynikiem współdziałania systemów przenoszenia genów, np. szybko rozprzestrzeniająca się wśród enterokoków wysoka oporność na glikopeptydy. Najprawdopodobniej nadmierne zużywanie określonych antybiotyków było bezpośrednią przyczyną wzrostu oporności niektórych bakterii.
88Mechanizmy obronne w drogach oddechowych
I.bariera błony śluzowej jamy nosa, krtani i tchawicy: 1.komórki nabłonka:podstawowe, wstawkowe, walcowate bezrzęskowe, walcowate rzęskowe (migawkowe)-wielorzędowy nabłonek migawkowy, kubkowe-mechanizm jednokierunkowy (przemieszczanie wydzieliny śluzowej w kierunku od oskrzeli do gardła) i mechanizm oczyszczający (klirens śluzowo-rzęskowy) 2.gruczoly surowicze 3. Komórki produkujące śluz (sklad śluzu:mucyna,laktoferyna, lipidy, białka Ig, lizozym) 4. Skupiska grudek limfatycznych (miejscowa produkcja Ig,głównie SigA) 5.makrofagi pęcherzykowe II.mechanizmy obronne na poziomie błony śluzowej układu oddechowego 1.fagocyty i fagocytoza: granulocyty, monocyty (makrofagi osiadłe)-akumulacja fagocytów i rozwinięcie ostrej reakcji zapalnej (masywna infiltracja ykanki pluc przez granulocyty oraz powstanie wysięku płucnego)- stymulacja akumulacji przez czynniki chemotaktyczne tj. cytokiny i chemokiny wydzielane przez kom.nabłonka, śródbłonka, osiadłe makrofagi pęcherzykowe oraz efektywne zwalczanie zakażenia, procesy gojenia
1.bariery fizykochemiczne:*skóra – pot , wydzielina grucz.łojowych, pH, złuszczanie naskórka, mikroflora stała, *bł. śluz. – lizozym, mikroflora stała, *spermina – w wydzielinie gr.krokowego, *wydz.oskrzelowa, surfaktant, *nabłonek rzęskowy, *mikroflora stała ukł.oddech., pokarm., *Sok żołądkowy, soki jelitowe, żółć, *Hormony, np. estrogeny zmieniają pH pochwy => zakażenia C. Albicans 2.fagocyty i fagocytoza, kom. NK, bazofile, mastocyty, płytki krwi, 3.dopełniacz i aktywacja sekwencyjna, 4.IFNa,b,g. 5.opsoniny. 6.cytokiny i zapalenie
152.chemioterapia-chemioterapia-leczenie zakażeń i nowotworów za pomocą leków syntetycznych,niszczenie drobnoustrojów w org. człowieka i zwierząt za pomocą chemioterapełtyków. Wyróżniamy chem. p/bakteryjna, p/wirusowa, p/grzybicza, p/pasożytnicza. zapobieganie zakażeniom za pomocą chemioterapeutyków to chemioprofilaktyka.chemioterapia racjonalna-jest to chem.celowana,wykonuje się bad. mikrobiologicznei i określa się na jaki chemioterapeutyk czynnik jest wrażliwy czy oporny, na tej podstawie stosujemy odpowiednią terapię, zasady chem racj.- 1.znajomość związków chemicznych,2.spektrum działania (ocena aktywności MIC, MBC, MIC 50, MIC 90, wąskie,szerokie, poszeżone spektrum i działanie selektywne)3.mechanizmy działania chemioterapeutyków a)inhibitory ściany kom. np.b-laktamy- penicyliny,ant.glikopeptydowe-wankomycyna b)inhibitory białka –aminoglikozydy, makrolidy, tetracykliny c)inh.kw.nukleinowych-chinolony i ryfamycyny 4.znajomość mech. nabywania odporności na chemioterapeutyki np.zmiany mutacyjne genów własnych, zmiany w transkrypcji i translacji,przekazywanie genów, synteza nowych układów białkowych 5.znajomość odpornosci krzyżowej na określone grupy terapeutyków 6.efekt poantybiotykowy- max. efekt po 2 godz. ekspozycji na stężenie 8-16 razy MIC 7.antybiogram lub antymykogram- podst. do wyboru chemiot. i jego dawki (ocena wrażliwości) 8.właściwości farmakokinetyczne i dostępność biologiczna chemioter. 9.toksyczność (współczynnik terapeutyczny- stosunek dawki toksycznej do d.t.) 10.znajomość skutków niepożądanych 11. wybór sposobów leczenia (normalne, intensywne, przewlekłe, droga podania dawki i ich liczba) 12.monoterapia 13.chemioterapia skojarzona. chemioter. empiryczna- polega na wyborze właściwego chemioter. do terapi zakażeń bez oczekiwania na wynik bad. mikrobiologicznego w oparciu o bad. epidemiologiczne
161.Wyminić i opisać kom. które uczestniczą w reakcjach odpornościowych.
neutrofil- obrona przed drobnoustr. (wzrost liczby w zakażeniu bakteryjnym a spadek w wirusowym) udział w fagocytozie posiadają ziarnistości (lizosomy) pierwotne (mieloperoksydaza, obejęt. proteazy, kwaśne hydrolazy i białka kationowe)wtórne (lizozym i inne enzymy) są często zabijane przez sfagocytowane toksyny (rola kamikadze) eozynofile- kwasochłonne,1-3% wszystkich, wzrost liczby w reakcjach alergicznych, zak. pasożytniczych i chor. nowotworowych, mają enzymy metabolizujące histaminę i leukotrieny (ograniczaję reakcje zapalne) produkują główne białko zasadowe, (uszkodzenie kom. nabłonka dr. oddech.) fagocytują kompleksy Ag-p/ciało zawierające IgE, bazofile- zasadochłonne, 0,5% wszystkich, odpowiednik mastocytów w tkankach, w ziarnistościach są liczne mediatory oraz ich prekursory (histamin, leukotrieny, PG, czynnik aktywujący płytki) normalnie mediatory uwalniane w małych ilościach, uwolnienie dużych ilości prowadzi do reakcji alergicznej I typu (astma, pokrzywka, wstrząs anafilaktyczny) monocyty- 10% wszystkich, odpowiednik makrofagów w tkankach, dzięki swoistym receptorom powierzchniowym, rozpoznają i fagocytują antygeny które uległy opsonizacji płytki krwi- udział w procesach krzepnięcia fagocytoza kompleksów imunologicznych, potęgują reakcje zapalne, są aktywowne przez mastocyty, które produkują czynnik aktywujący płytki (PAF) komórki NK- komórki z naturalna cytotoksycznością zabijają kom. nowotworowe lub zarażone wirusami przy braku przeciwciał lub ich aktywacji (naturalny limfocyt) posiadają liczne ziarna azurofilne a w nich perforynę i proteazy serynowe, stymulowane są przez interferon a,b, interleukinę 2,12, hamowane przez PGE2, IL4, kortyzol, biorą udział w ADCC limfocyty B- wytwarzają swoiste p/ciała, pod wpływem bodźca antygenowego (za pośrednictwe limf.Th i makrofagów) powstaje kilka kom. plazmatycznych- wytwarzają specyficzne p/ciało bo pochodzą od jednego limfocytu (stanowią klon) limf.B stymulowane są przez Th, a hamowane przez Ts- T-zależne, lub nie ymagają pomocy T-niezależne, limf.T- Th- kom. CD4 aktywują limf.B uczestnicza w reakcjach nadwrażliwości przyciągają i aktywują inne komórki, Ts są to kom. CD8, hamują czynność limf.B i innych kom.T, Tc są to CD8+, uczestniczą w procesach zabijania kom. zakażonych wirusami i kom. nowotworowych, Tcs kontrsupresyjne sprawiają że antygen indukuje odpowiedź imunologiczną miejscową bez wpływu na uogólnioną odp. organizmu, występują w śledzionie, w GALT-tkance limf. prz. pokarm.. Limfocyty T posiadają receptory wiążące antygen TCR, limf.T a,b TCR składa się z łańcuchów ab połączonych mostkiem disiarczkowym, dominują we krwi obwodowej, limf.T g,d TCR z łańcuchów gd, występują w nabłonku błon śluzowych i na skórze uczestniczą w odp. p/bakteryjnej i ADCC (receptor dla fragmentu Fc IgG) wytwarzają cytokiny TNFb i GM-CSF, aktywuja makrofagi,
112 Odporność kom. i humoralna-co to jest, co warunkuje, sposoby wykrywania.
O. humoralna-swoista -IgM –powstaje najwcześniej po zakażeniu,pojawienie się jej wskazuje na zakażenie czynne,występuje w postaci pentamerów poł.łać. J *G – podklasyG1-G4, powinowactwo do Ag białkowych-G1>G2>G3>G4;przechodzi przez łożysko(odpornośc swoista bierna naturalna),wiąże dopełniacz, bierze udział w ADCC,fagocytozie immunologicznej;w surowicy wyst.w postaci monomeru, wytwarz w w.chłonnych, śledzionie.*A – Ig pierwszej linii obrony, wyst.na pow.bł.śluz, nie wiąże dopełniaczaànie uczestniczy w opsonizacji tylko w neutralizacji, wyst.w post.cząst.Sc-IgA=2IgA+łańcuch J+fragment wydzielniczy) *D-reguluje czynność l.B, nie wiąże dopełniacza *E –wiążąc sie z mastocytami i bazifilami uczestniczy w reakcji nadwrażliwości typuI, nie wiąże dopełniacz, udziałw ADCC. Rola Ig: udział w ADCC(cytotoksyczność zależna od przeciwciał= Ig głównie G i E końcem Fc łącza się kom.efektorowymi t.j. monocytami/makrofagami, NK, eozynofilami, neutrofilami, płytkami krwi bez udziału dopełniacza, a końcem Fab z Ag), udział w neutralizacji( po kontakcie z Ag tworzą się anatoksyny), udział w aktywacji dopełniacza i fagocytozie immunologicznej, udział w nadwrażliwości typ I-III -cytokiny -nieswoista -składniki dopełniacza (współuczestniczy w uwolnienianiu anafilotoksyn, są cz.chemotaktycznym, nasilają fagocytoze, powodują lizę k.obcych) - białka opsonizujace(b.C-reaktywne,b.wiązace mannoze,b.wiążące LPS,to są tez IgM i IgG) -mediatory zapalenia(PG,LT) - IFN(odpornośc nieswoista p.wirusowa)oraz inne cytokiny zapalne(Il-1,Il-6,Il-8,TNF-a,GM-CSF) -lizozym(bakteriobójczo na G+) -białka ostrej fazy
-naturalne kom.bójcze NK należące do kom.zerowych oprócz kom.NC, LAK,TIL,K(= kom.podobne do l.T i B ale nie mające charakterystycznych dla nich markerów) –mastocyty -bazofile - płytki krwi -swoista-kom.prezentujace Ag-APC(monocyty/makrofagi.l.B,k.dendrytyczne,i po nasileniu ekspresji MHCII przez IFN tez sródbłonek nacz.krwionosnych,k.wysp trzustkowych, k.mezangium, astrocyty, keratynocyty,k.nabłonka dróg żółciowych,chondrocyty) -limfocyty T(Th,Ts,Tc) àbezpośrednie niszczenie z udz.CD4 i CD8 wirusow , k. nowotworowych, bakteri, a Th2 m.in. stym l.B do transformacji blastycznej--.wydz. Ig -fagocytoza immunologiczna. Sposoby wykrywania odpornosci kom.swoistej:
In vitro A) odczyn zahamowania migracji leukocytów 1 Próbówke kapilarową z zawiesiną leukocytów krwi pacjenta kładziemy na dno komory. 2 napełniamy dno podłożem hodowlanym. 3 rownolegle robimy probę kontrolną. 4 do jednej z komór dodajemy Ag. 5 inkubujemy. Wykorzystujemy zdolnosc leukocytow do nieukierunkowanej, spontanicznej migracjiàpowstaje efekt obłoczka, jeżeli limfocyty są uczulone na dodany Ag to wytwarzaja LIF(czynnik ham.migracje limfocytow)àmały obłoczek. Miarą reakcji jest wskaźnik zahamowania migracji=śr.obszar mig. kom. z Ag/śr. obszar mig. kom. bez Ag. B) test transformacji blastycznej. 1 krew od pacjenta+Ag badanyà inkubacja 3 doby. 2 rozmaz barwiony met. Giemzy. 3 liczenie %form blastycznych lub mierzymy ilość znakowanej trytem tymidyny,która została włączona do DNA komórki ulegającej transformacji. C) testy rozetowe-rozeta = limfocyt do kt. w czasie inkubacji przyczepiają się erytrocyty; limfocyty T + erytrocyty=rozeta E: * l.T+erytrocyty barana(bo dla nich l.T mają receptoryàinkubacjaàwirowanie w gradiencie stężeń aby oddzielić rozety od innych grupàliza erytrocytow i otrzymanie populacji l.T * l.B+IgG lub IgM połączony fragmentem Fc z l.B+erytrocyt połączony z Fab Ig = rozeta EA: przebieg taki sam jak wyżejàefekt to czysta populacja l.B
In vivo A) testy skórne-śródskórne testy alergiczne(odpowiedz typu IV) -proba tuberkulinowa RT 23, -test Burneta na brucellozę, -test Forshaya w tularemii, -test Fernandeza w trądzie -test z Ag nowymi( z dwunitrochlorobenzenem=DNCB w w odstępach czasu po co raz mniejszej dawce) Żywy odczyn świadczy o sprawnie działającej odp.kom. Sposoby wykrywania odp.kom.nieswoistej: Badanie aktywności fagocytarnej:zawiesina makrofagów z granulocytami krwi obwodowej+cząst. fagocytowanaàinkubacja àrozmazàbarwienie met.Giemzyàliczymy: %fagocytozy=l.kom.fagocyt./l.wszystkich oglądanych kom. Index fagocytozy=średnia l.cząst.wchłoniętych/l.kom. żernych
Dr.Rockit